利用人工RNA编辑恢复遗传密码

由点突变引起的各种遗传疾病没有建立的治疗方法。Tsukahara教授及其同事（日本先进的科学和技术研究院）正在研究使用人造RNA编辑的治疗方法。据宣布，今年的诺贝尔化学奖化学奖将被赋予那些发现基因组编辑的CRISPR / CAS9的科学家。

尽管基因组编辑是作为基因修复技术引起的关注，但是如CRISPR / CAS9的基因组编辑可能导致基因组DNA的永久性改变，可能影响多个基因座。目前，在体内的所有有针对性的细胞中进行准确的基因组编辑是非常困难的。因此，可以在受精卵，胚胎或细胞中编辑基因组，但是，它不适合基因治疗在人类身上。此外，基因组编辑还引发了伦理问题。

因此，研究人员认为基因组编辑是一种适用于“体外”技术或用于受精卵的方法，但不适用于整个病人的身体。相反，由RNA编辑引起的变化不是永久性的，因为它们不影响基因组序列，可以以特定顺序的方式完成。因此，为了治疗的目的，RNA编辑是最好的基因组编辑Tsukahara教授说。人工定点RNA编辑是一种重要的基因修饰和调控技术蛋白质功能．研究人员正试图通过人工RNA编辑来修改转录本(RNA)的遗传密码，以治疗遗传疾病。

RNA编辑是生物过程，生物体中的普及普及，以产生来自单个基因不同功能的各种蛋白质。在哺乳动物中，RNA链的C或A是碱基序列 - 特异性水解脱模，由此C由U和I（Inosine）代替。这些基础转换是由于A或C的脱氨化而发生，这已被发现被ADAR和Apobec家族酶催化，然后在RNA中改变遗传码。在这方面纸，研究人员首次报告了Apobec1成功地对突变的RNA进行了人工C-TO-U转化。

许多遗传性疾病是由T-to-C点突变引起的。因此，编辑突变基因是治疗这些疾病的一种有前途的策略。研究人员将APOBEC1(载脂蛋白B mRNA编辑催化多肽1)的脱氨酶结构域与与靶信使RNA (mRNA)互补的导向na (gRNA)结合，设计了一种人工RNA编辑酶。

在这个人工酶系统中，gRNA与MS2的茎环结合，脱氨酶结构域与MS2的外壳蛋白融合，能够将突变的目标核苷酸从c转化为u。作为目标RNA，他们使用了编码蓝色荧光蛋白(BFP)的RNA, BFP来自编码GFP的基因，该基因由199T >c突变而来。两种成分(脱氨酶和gRNA)的瞬时表达后，他们通过共聚焦显微镜观察GFP，发现突变的199C在BFP中被转化为U，恢复了GFP的原始序列。

通过PCR-RFLP（聚合酶链反应限制片段长度多态性）证实该结果使用转染细胞的cDNA来证实，Sanger的测序，揭示了约21％的编辑效率。深rna测序结果表明，该系统中的偏离目标编辑足够低。研究人员使用人工脱氨酶（Apobec1）与MS2系统组合的人工RNA编辑系统成功地开发了通过在MRNA水平恢复野生型序列来治疗遗传疾病的治疗。

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