新的激酶检测方法有助于识别癌症药物的靶标

普渡大学(Purdue University)的研究人员开发了一种高通量方法，将激酶与它们磷酸化的蛋白质进行匹配，加快了识别多种潜在抗癌药物靶点的能力。

激酶是催化磷酸基团转移到另一个磷酸酯的蛋白质蛋白质，一种称为磷酸化的过程，其是蛋白质功能的关键。许多磷酸化蛋白质是癌症，可以引发形成的那些癌细胞。

市场上有几十种激酶抑制剂用于治疗癌症。但是癌细胞会适应，使得一些药物的效果降低。新的激酶靶点将带来新的药物，为那些难以治疗的癌症患者提供多样化的治疗选择，这是一个漫长而乏味的过程。

“这些是癌症生长和增殖的关键分子，”普渡大学生物化学教授w·安迪·陶(W. Andy Tao)说ACS中央科学。“了解可以磷酸化癌基因的所有替代激酶非常重要，所以如果我们看到抵抗，我们重新定位它。”

以前，没有现有的方法可以系统地识别激酶负责磷酸化致癌基因。Tao和来自普渡大学药物化学和分子药理学(MCMP)、化学系和普渡大学癌症研究中心的合作者开发了一种强大的方法，可以快速筛查激酶蛋白质相互作用。Tao和他的合作者，MCMP的胡常登教授，在一次科学静修中遇到并想出了这个想法，但他们花了几年时间才最终解决了技术细节问题。

该方法利用了一种被称为双分子荧光互补(BiFC)的成像分析方法，其中一个荧光蛋白被分裂成两个片段，标记的末端N和c。一个末端被添加到一系列激酶中，另一个被放置到目标致癌基因中。

“如果这两种蛋白质相互作用，它们会把N端和C端拉到一起，然后一个完整的荧光蛋白就可以重组发出荧光。”胡锦涛说。

由于荧光，连接的蛋白质是可见的，但科学家可以使用快速质谱鉴定激酶。研究人员在一个包含559种人类激酶的文库中测试了他们的方法，并能够从文库中识别出新的激酶，并通过其他生化分析证实它们。

陶说，他们报道的方法在此集成了两个尖端的生物化学技术，以实现底物的潜在蛋白激酶（E..G，致癌蛋白）的潜在蛋白激酶。这方法是通用的，可用于筛选任何蛋白质基质的新型蛋白激酶。对于下一步，他们正在使用涉及的阶段蛋白质癌症发展。它们的大多数激酶还不为人所知。

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