量化肝细胞中乙型肝炎病毒库的新标准

大约有3亿人慢性感染乙型肝炎病毒，这种病毒可导致肝硬化或癌症。因此，迫切需要开发HBV治疗方法。然而，由于HBV独特的复制策略，在临床前和临床研究中必不可少的被感染肝细胞中病毒DNA的量化在技术上是困难的，而且没有标准化。

由DZIF科学家领导的一个国际研究联盟现在制定了优化、控制和验证定量病毒DNA测量的建议，这可能对治疗策略的临床前和临床评估至关重要。

HBV是一种DNA病毒，专门感染人类肝细胞。感染后，病毒的DNA基因组被细胞酶转化为共价闭合环状DNA (cccDNA)，与细胞染色体蛋白结合，在细胞核内形成稳定的迷你染色体。在这种形式下，病毒DNA充当了形成新病毒颗粒的模板。

临床前和临床HBV研究的一个主要限制是缺乏标准化的基于pcr的方法来特异性定量HBV感染样本中以cccDNA形式存在的病毒DNA。

作为国际消除乙型肝炎病毒联盟(ICE-HBV)支持的国际联盟的一部分，汉堡-埃彭多夫大学医学中心的DZIF科学家海德堡大学和慕尼黑工业大学与法国国家病毒研究机构hépatites virales (ANRS)和美国吉利德科学公司的同事合作，比较了方案，并制定了基于证据的最佳实践指导，以通过定量PCR量化cccDNA。

在比较不同的HBV DNA定量方案时组织样本“我们发现，不同形式的病毒DNA共存以及样本保存和处理条件强烈影响基于pcr的HBV cccDNA定量，”DZIF年轻研究员Lena Allweiss博士说，他领导了六个参与实验室的合作。基于研究结果，该团队为HBV cccDNA定量测量的优化、控制和验证制定了样本类型定制的方法建议。

“这项研究将有助于HBV治愈研究项目，旨在评估治疗对细胞HBV库的影响临床前研究和临床试验研究负责人、汉堡-埃彭多夫大学医学中心DZIF科学家莫拉·丹德里教授说。