科学家开发方法以更有效地分离和识别稀有T细胞

来自Eli和Edy的科学家和UCLA的宽阔的再生医学和干细胞研究中心开发了一种技术，使研究人员能够更有效地分离和鉴定能够靶向病毒，癌症和其他疾病的稀有T细胞。

这种方法可以增加科学家对这些关键因素的理解免疫细胞对广泛的疾病做出反应，并推动T细胞疗法的发展。这包括旨在增强癌症或病毒靶向T细胞功能和数量的免疫疗法，以及旨在调节在糖尿病和多发性硬化症等自身免疫性疾病中过度活跃的T细胞活动的疗法。

今天发表的研究国家科学院的诉讼程序，描述了新方法，称为Clint-SEQ，结合和改善现有技术以收集和遗传序列稀有T细胞。

“T细胞对于保护身体对抗感染和癌症是至关重要的，”Pavlo Nesterenko表示，新论文的第一作者和欧文博士博士实验室的研究生。“他们都是身体的效果和组织者适应性免疫应答，这意味着它们可以用作治疗方法，并研究他们的动态可以在整体免疫活动上发光。“

T细胞之所以能从其他免疫细胞中脱颖而出，是因为它们的表面有一种叫做T细胞的分子受体它能识别被称为抗原的外来蛋白质片段。

我们的身体每天生产数百万和数百万的T细胞，这些细胞中的每一个都有其自身不同的受体。每个T细胞受体能够识别一种特异性抗原。一个T细胞受体可能识别出从病毒引起常见感冒的病毒的抗原，而另一种可能识别来自乳腺癌的抗原。

当T细胞遇到抗原其受体识别时，它弹簧以动作，产生大量的自身拷贝并指示免疫系统的其他部分攻击患有该抗原的细胞。

世界各地的研究人员正在探索从患者身上收集带有靶向癌症或其他疾病(如SARS-CoV-2病毒)受体的T细胞的方法，在实验室中扩大这些细胞，然后将更大数量的靶向T细胞送回患者体内，以增强其活性免疫反应。

“问题是，在大多数细胞的群体中，我们可以访问，无论是从人体其他部分所取的外周血或样品，具有感兴趣的受体的T细胞都在非常低的数量中发现，”威特，高级UCLA宽松干细胞研究中心论文和创始总监。“捕获和识别这些T细胞的现有方法是劳动密集型和需要改进。”

这一过程效率低下的部分原因是，当T细胞识别出它们有相应受体的抗原时，它们会发出信号，促使附近的其他细胞部分激活。

“这些所谓的旁观者细胞会被周围的活动激活，但并不真正能够对引发免疫反应的抗原作出反应，”Witte说，他是微生物系发育免疫学主席，他是加州大学洛杉矶分校琼森综合癌症中心的成员。

当研究人员试图使用传统方法将具有特异性受体的T细胞分离出来时，最终捕获许多这些旁观者细胞。Clint-SEQ通过结合一种技术来减轻该问题，该技术使研究人员能够将T细胞与来自最旁观者细胞的感兴趣的受体区分开来。

用特异性受体分离T细胞只是第一步。为了使这些分离的细胞有用，需要使用基于液滴的mRNA测序分析它们，也称为Drop-SEQ，其可以一次测量数千个个体细胞中的信使RNA表达。

“一旦你知道感兴趣的T细胞受体的顺序,您可以使用这些信息来开发疗法使更多的细胞在治疗癌症和病毒或推出这个受体序列的调节性T细胞抑制免疫反应的过度表达在一个给定的地区,”涅斯捷连科说。

分离带有特定受体的T细胞的过程需要用化学物质固定细胞内的内容物，这些化学物质可以在每个细胞内的蛋白质和周围环境之间形成化学键——这种技术被称为交联。不幸的是，交联会降解T细胞的RNA，这使得Drop-seq分析非常具有挑战性。CLInt-Seq通过使用一种可逆的交联方法克服了这一障碍，从而保持了T细胞的RNA。

Witte说:“该系统的创新之处在于，它结合了一种改进的方法，这种方法可以更特异性地识别t细胞受体，同时还结合了一种化学适应，使这一过程与基于液滴的mRNA测序兼容。”“这解决了寻找用于治疗癌症和其他疾病以及病毒感染的t细胞受体的核心挑战——从导致COVID-19的病毒等急性病毒到eb或疱疹等慢性病毒。”

Witte实验室正在利用这项技术解决一系列科学问题，包括识别对SARS-CoV-2病毒有反应的t细胞受体，开发t细胞治疗前列腺癌的疗法。

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